Elektroforese: wat it is, wêr't it foar is en hoe't it wurdt dien
Kontint
- Wêr is it foar
- Hoe't it wurdt dien
- Soarten elektroforese
- 1. Hemoglobine-elektroforese
- 2. Proteinelektroforese
Elektroforese is in laboratoariumtechnyk dy't wurdt útfierd mei as doel molekulen te skieden neffens har grutte en elektryske lading, sadat de diagnoaze fan sykten kin wurde makke, proteïne-ekspresje kin wurde ferifieare of mikro-organismen kinne wurde identifisearre.
Elektroforese is in ienfâldige en goedkeape proseduere, brûkt yn laboratoariumsroutines en yn ûndersyksprojekten. Neffens it doel fan elektroforese kin it nedich wêze om oare testen en eksamens út te fieren om bygelyks in diagnoaze te berikken.
Wêr is it foar
Elektroforese kin foar ferskate doelen wurde útfierd, sawol yn ûndersyksprojekten as yn diagnoaze, om't it in ienfâldige en goedkeape technyk is.Sa kin elektroforese wurde útfierd nei:
- Identifisearje firussen, skimmels, baktearjes en parasiten, mei dizze applikaasje faker foar yn ûndersyksprojekten;
- Paternity test;
- Kontrolearje de ekspresje fan aaiwiten;
- Mutaasjes identifisearje, bygelyks nuttich by de diagnoaze fan leukemyen;
- Analysearje de soarten sirkulearjend hemoglobine, nuttich yn 'e diagnoaze fan sikkelceloanemia;
- Beoardielje de hoemannichte proteïnen dy't yn it bloed binne.
Neffens it doel fan elektroforese kin it nedich wêze om oare komplementêre toetsen út te fieren foar de dokter om de diagnoaze te foltôgjen.
Hoe't it wurdt dien
Om de elektroforese te dwaan is it gel nedich, dat kin wêze fan polyacrylamide of agarose, ôfhinklik fan 'e objektive, elektroforese-buffer en vat, molekulêre gewichtsmerker en in fluoreszeare kleurstof, neist in UV- of LED-ljochtapparatuer, ek wol transilluminator neamd ,
Nei it tarieden fan 'e gel moat in spesifyk foarwerp wurde pleatst om de boarnen yn' e gel te meitsjen, yn 'e folksmûle de kam neamd, en lit de gel sette. As de gel klear is, pas de stoffen gewoan oan op 'e putten. Hjirfoar moat in molekulêr gewichtsmerker wurde pleatst yn ien fan 'e boarnen, in positive kontrôle, dat is de stof dy't bekend is wat it is, in negative kontrôle, dy't de jildigens fan' e reaksje garandeart, en de te analysearjen monsters. Alle foarbylden moatte wurde mingd mei in fluorescerende kleurstof, om't dizze manier it mooglik is de bannen op 'e transilluminator te visualisearjen.
De gel mei de foarbylden moat wurde pleatst yn 'e elektroforese vat, dy't de spesifike bufferoplossing befettet, en dan wurdt it apparaat ynskeakele, sadat d'r elektryske stream is en, dêrom, potensjaal ferskil, dat wichtich is foar de skieding fan' e dieltsjes neffens oan har lêst en grutte. De elektroforetyske rintiid ferskilt neffens it doel fan 'e proseduere, en kin oant 1 oere duorje.
Nei de bepaalde tiid is it mooglik om it resultaat fan 'e elektroforetyske rûn troch de transilluminator te besjen. As de gel ûnder UV- of LED-ljocht wurdt pleatst, is it mooglik it bânpatroan te sjen: hoe grutter it molekule, hoe minder it migreert, tichterby de boarne komt, wylst hoe lichter it molekúl, hoe grutter it migreringspotensiaal.
Foar de falidaasje fan 'e reaksje is it needsaaklik dat de bannen fan' e positive kontrôle wurde visualisearre en dat yn 'e negative kontrôle neat wurdt visualisearre, want oars is it in oanwizing dat d'r fersmoarging wie, en it hiele proses moat wurde werhelle.
Soarten elektroforese
Elektroforese kin foar ferskate doelen wurde útfierd en, neffens har doel, kinne ferskate soarten gel wurde brûkt, de meast foarkommende binne polyacrylamide en agarose.
Elektroforese om mikro-organismen te identifisearjen is faker te wurde útfierd yn ûndersykslaboratoaria, lykwols, foar diagnostyske doelen kin elektroforese wurde brûkt om hematologyske sykten en sykten te identifisearjen dy't evolearje mei de ferheging fan 'e hoemannichte proteïnen, de wichtichste soarten elektroforese binne:
1. Hemoglobine-elektroforese
Hemoglobine-elektroforese is in laboratoariumtechnyk dy't wurdt útfierd om de ferskate soarten hemoglobine dy't yn it bloed sirkulearje te identifisearjen, wêrtroch it mooglik is de oanwêzigens fan sykten te identifisearjen yn ferbân mei hemoglobinsynthese. It type hemoglobine wurdt identifisearre troch elektroforese by in spesifike pH, ideaal tusken 8,0 en 9,0, mei in patroan fan bands dy't ferifieare wurde dat kin wurde fergelike mei it normale patroan, wêrtroch de identiteit fan 'e oanwêzigens fan abnormale hemoglobinen kin wurde identifisearre.
Wêr't it foar makke is: Hemoglobine-elektroforese wurdt útfierd om sykten te ûndersiikjen en te diagnostisearjen relatearre oan hemoglobinsynthese, lykas segelzellanemy en hemoglobine C-sykte, neist it nuttich te wêzen by it ûnderskieden fan thalassemia. Learje hoe't jo hemoglobine-elektroforese ynterpretearje.
2. Proteinelektroforese
Proteinelektroforese is in eksamen frege troch de dokter om de hoemannichte proteïnen dy't yn it bloed sirkulearje te beoardieljen en sadwaande sykten te identifisearjen. Dizze test wurdt dien fanút in bloedproef, dat wurdt sintrifugeare om it plasma te krijen, hokker diel fan it bloed, besteande, ûnder oare stoffen, út aaiwiten.
Nei elektroforese kin in patroan fan bannen wurde visualisearre en dêrnei in grafyk wêryn de kwantiteit fan elke fraksje fan aaiwiten wurdt oanjûn, wêzentlik fûnemint foar de diagnoaze.
Wêr't it foar makke is: Proteinelektroforese lit de dokter it foarkommen fan meardere myeloom, útdroeging, cirrose, ûntstekking, leversykte, pankreatitis, lupus en hypertensie ûndersykje neffens it bandpatroan en de grafyk presintearre yn it ûndersyksrapport.
Begripe hoe't it wurdt dien en hoe it resultaat fan proteïne-elektroforese te begripen is.